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waters液相色譜柱使用過程中須注意的事項(xiàng)

更新時間:2018-05-15  |  點(diǎn)擊率:3348
   waters液相色譜柱使用過程中須注意的事項(xiàng)
  waters液相色譜柱是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。waters液相色譜柱根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)?,F(xiàn)代waters液相色譜柱由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有、快速、靈敏等特點(diǎn)。waters液相色譜柱系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。在使用waters液相色譜柱過程中,須注意以下事項(xiàng):
  1、新waters液相色譜柱在使用前,須先用甲醇或乙腈試劑以20倍柱體積低流速沖洗,作用是使固定相能充分潤濕、碳鏈?zhǔn)嬲?,使waters液相色譜柱的性能達(dá)到狀態(tài)。具體操作是,將配制好65%的乙腈/水沖洗后,把waters液相色譜柱進(jìn)口端連接在色譜儀上,出口端放空(不可連上檢測器,以免污染了檢測器),以0.1ml/min~0.5ml/min的低流速將色譜柱中的清稀溶液吹干,過20分鐘后再接上檢測器,以1.0ml/min的流速,繼續(xù)沖洗2~8小時;
  2、waters液相色譜柱檢測分析樣品完畢后,須沖洗色譜柱。尤其是流動相中含有酸或鹽時,需將色譜柱中的酸或鹽沖洗干凈,通常建議用10%甲醇水沖洗20倍柱體積;
  3、若waters液相色譜柱處于長期閑置狀態(tài)時,要將色譜柱*沖洗,建議沖洗3-4小時以上,zui后保存在純有機(jī)試劑或高比例的有機(jī)試劑溶液(如90%甲醇水)中;
  4、由于waters液相色譜柱的固定相疏水性較強(qiáng),waters液相色譜柱在使用過程中盡量不要使用高水相條件,若水相比例過高易引起固定相疏水塌陷,引起柱效迅速下降,甚至造成不可逆的負(fù)面影響;由于碳載量高,表現(xiàn)尤為明顯,建議使用過程中水相比例不超過90%;
  5、waters液相色譜柱壓力升高、柱性能下降:通常為色譜柱被污染,對waters液相色譜柱進(jìn)行再生處理可恢復(fù)部分柱效;
  6、waters液相色譜柱壓力驟升:通常由鹽析出或篩板堵塞引起,若是鹽析出,用10%甲醇水低流速沖 洗至壓力恢復(fù)即可;若判斷并非鹽析出,以純甲醇或10%甲醇水為流動相反沖色譜柱(將waters液相色譜柱反接,不接檢測器),若反沖半小時仍無效果則說明反沖無效,需尋找其他原因。
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